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ミクロの世界⑤ 細菌テスト法(液体培地)

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寒天培地はゲル状であって半固体である。また細菌は少しの栄養と水分があれば生きて行ける。
寒天の表面上にコロニーを形成する菌は好気性細菌で、寒天中にコロニーを形成するものもあり嫌気性細菌という。
またコロニーを形成すれば何らかの菌であるが、必ずしもコロニーが形成されなければ菌が無いという事にはならない。
例えば忘れた頃に、突然コロニーを形成する菌もあるからで、試験は温度と時間を統一せねばならない。
先に継代培養で菌を我が手中にする術を述べたが、これはテストへの序章に過ぎない。

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今回は液体培地に関わる、あるテスト法を述べたい。
寒天上にあるコロニーを寒天の含まない液(液体培地)に溶かすと菌液が出来る。
この段階では濃い状態だが、9mLの液に濃い菌液1mlを加えれば×10倍の菌液となる。
これを繰り返し、とある濃度で0.1mLを寒天培地に接種しコロニーが100CFUあったとすれば、
逆算して初めの菌液濃度(CFU/mL)が求まる。
この濃い菌液を、今度はAQ200ppm-9mLに1mLを添加したらどうなるであろうか。答えは瞬時に除菌されてしまう。
ここで仮に濃度1/10の20ppm-9mLに1mLを添加したらどうであろうか。恐らく瞬時にではなく、数分を要するかもしれない(未テスト)。
つまり有効塩素濃度が200ppmもあれば、時間的にはあっという間に除菌となるのだが、
AQの濃度が薄い場合には時間が必要な事が知れており、且つ菌種によっても時間が違ってくる。
菌種による違いで最も除菌され辛いとされているものの中に芽胞菌というのがあって、
濃い濃度で且つ数分の時間を必要とされている。
ここで時間の制約を「何分で試験を停止する事は可能か」と考えてしまうが、
ミクロの世界③魚への影響で述べたが、塩素の効力を無くすのに適した試薬があり「チオ硫酸ナトリウム」を使用すれば、
先のAQ200ppm-9mLに1mLの菌液を接触させ、とある経過時間に適量の「チオ硫酸ナトリウム」を添加すれば、
その塩素の効果は時間で停止することが出来る訳だ。
詳細の情報が必要な場合には、【各種消毒薬との除菌力比較】を参考にされたし。https://n-hakko.com/aq_faq.html
By分析S 11/20

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ミクロの世界④ 細菌テスト法(継代培養)

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細菌(バクテリア)は基本的に肉眼では見ることが出来ない(視認不可)。
それを実現可能にしたのが顕微鏡であるが、また別に細菌を増殖したものなら視認可能である。
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この事とは別に、細菌を扱うにあたり「コッホの3原則」が重要であり、
1.(例えば病気で)多種雑多な菌が混在している中から、1種類の細菌を分離出来る事(単離)。
2.単離できた菌を純粋に培養出来る事(純粋培養)。
3.そして、純粋に培養出来た菌を接種(例えば健康な肌)すると、1.と同じ病気になる事。
が挙げられるが、純粋に培養できると細菌は順調に倍々に増殖するので、
初めは目に見えなくとも寒天培地上にはやがて一塊の群れが出来る。これをコロニー(CFU)という。
たった1つのコロニー(多数の群れ)でも、最初はたった1つの菌なのである。
実際、純粋培養された培地上には数点のコロニーが発現されるが、
やがて寒天培地上の栄養分や、特に水分が失われ菌は死んでしまう。
それでは折角純粋に単離できた菌を利用する事が出来ないので、
利用上その菌を残す為の一つの方法として、冷凍保存があり、他には「継代培養」すればよい。
継代培養とは1コロニーから、新しい培地に菌を植え付けて塗布させるのだが、
数日もすれば新しい培地上の各所に、新しいコロニーが出てくる。
これを繰り返しして行けば(継代培養)、何時でも利用することが出来、菌を我が手中に確保できる。
何れの操作も無菌的(手中以外の菌は雑菌なので)な操作が必要不可欠であり、
無菌的な状態を維持するためには、作業前にシュッ、作業中ミスをすればその個所にシュッ、
作業の最後にはシュッ、シュッ、シュッとAQ水で除菌をすれば確実であった。
By分析S

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